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徕卡激光共聚焦显微镜能够检测到非常微弱的荧光信号

更新时间:2025-06-19      点击次数:42
  徕卡激光共聚焦显微镜能够获得比普通光学显微镜更高的分辨率,可以清晰地观察到细胞内精细的结构和微小的病变。例如在神经科学研究中,可以更清楚地看到神经元的细微结构和突触的形态。通过对样品进行逐层扫描,可以获得一系列不同深度的光学切片,重建出样品的三维结构。这对于研究生物组织的立体结构、细胞间的空间关系等具有重要意义,比如在胚胎发育研究中观察器官形成的三维过程。
 
  能够检测到非常微弱的荧光信号,对于低表达水平的荧光标记样本也能有很好的成像效果,有助于发现一些难以察觉的生物分子和细胞活动。可以在不破坏细胞活性的情况下,对活细胞进行长时间的动态观察,实时记录细胞内的各种生理过程,如细胞分裂、物质运输等,为研究细胞的生命活动提供了有力工具。可以同时对多个荧光标记的样本进行成像,方便研究不同物质或结构在同一细胞或组织中的分布和相互关系,例如在免疫荧光实验中同时观察多种抗原的表达情况。
徕卡激光共聚焦显微镜
 
  徕卡激光共聚焦显微镜的基本工作原理:
 
  -点光源照射:以激光作为光源,激光束通过照明针孔,形成直径小的点光源。这个点光源经过透镜系统后,准确地聚焦在样品焦平面上的某一个微小点上。由于激光具有高度的方向性和相干性,能够提供高强度、高稳定性的照明,为后续的成像奠定了基础。
 
  -逐点扫描:在点光源聚焦于样品焦平面上的某一点后,开始进行逐点扫描。通过精密的扫描装置,控制激光束在样品焦平面上按照一定的规律进行移动,依次对焦平面上的各个点进行照射。每一次照射都只激发样品焦平面上一个小区域内的荧光物质,使其发出荧光。
 
  -点探测成像:被激光激发的荧光会向各个方向传播,其中一部分荧光会沿着原路返回,通过透镜系统再次到达探测针孔。由于只有焦平面上的点发出的荧光能够准确地通过探测针孔,而焦平面以外的杂散光则会被探测针孔阻挡在外,因此大大提高了成像的对比度和清晰度。穿过探测针孔的荧光被光电倍增管等高性能探测器接收,并将其转换为电信号。这些电信号经过放大、处理后,被传送到计算机中进行进一步的分析和处理,形成清晰的共聚焦图像。
 

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